Formas Esporuladas Clostridium V1

of 9
All materials on our website are shared by users. If you have any questions about copyright issues, please report us to resolve them. We are always happy to assist you.
Categories
Published
Documento
    PROCEDIMIENTO TÉCNICO PARA EL AISLAMIENTO  Y RECUENTO DE FORMAS ESPORULADAS   Clostridium sulfito reductor    ICMSF CODIGO P-SA-81 FECHA DE EMISIÓN 22/07/2016 VERSIÓN 01 PÁGINA Página 1 de 9 PROCEDIMIENTO PARA EL AISLAMIENTO Y RECUENTO DE FORMAS ESPORULADAS DE  Clostridium sulfito reductor EN MUESTRAS DE ALIMENTOS DE CONSUMO HUMANO ICMSF ELABOR REVIS APROB REFERENTE DE LABORATORIO REPRESENTANTE DE CALIDAD DIRECTOR (S) TECNICO (S) SECRETARIO DE SALUD REPRESENTANTE DE LA DIRECCIN    PROCEDIMIENTO TÉCNICO PARA EL AISLAMIENTO  Y RECUENTO DE Formas Esporuladas   Clostridium  sulfito reductor    Clostridium sulfito reductor    EN MUESTRAS EN ALIMENTOS DE CONSUMO HUMANO   CODIGO P-SA-81 FECHA DE EMISIÓN 22/07/2016 VERSIÓN 01 PÁGINA Página 2 de 9 1. OBJETIVO Describir la Técnica de Aislamiento y recuento de bacterias de Esporas Clostridium  sulfito reductor    para detectar el número de unidades formadoras de colonias (UFC) en análisis microbiológico en alimentos de consumo humano. 2. ALCANCE El procedimiento técnico de Aislamiento y recuento de bacterias de Esporas Clostridium sulfito reductor    en  Alimentos de consumo humano, aplica a todas las muestras para análisis microbiológico que son recepcionadas y analizados en Laboratorio de Salud Pública 3. DEFINICIONES    Clostridium sulfito reductor: Son aquella bacterias de morfología bacilar gram positiva, anaerobias estrictas, capaces de formar esporas y con capacidad de reducir el sulfito a sulfuro. Son colonizadores habituales del intestino humano y de algunos animales. Esta cualidad unidad a la alta resistencia de sus esporas le dan valor como indicadores de contaminación fecal de carácter no reciente tanto en agua como en alimentos    Espora:  Célula reproductora producida por ciertos hongos, plantas (musgos, helechos) y algunas bacterias. Ciertas bacterias producen esporas como mecanismo de defensa. Las esporas bacterianas tienen paredes gruesas y pueden resistir las altas temperaturas, la humedad, la acción de productos de limpieza y otras condiciones desfavorables. Unidades formadoras de colonias (UFC):  Término que debe utilizarse para reportar la cuenta de colonias en placa. Siembra volumétrica: Este método de siembra consiste en sembrar una muestra liquida, en medio de cultivo sólidos o líquidos. 4. RESPONSABLES Será responsabilidad del profesional asignado a la sección del Análisis Microbiológico de  Alimentos, del Laboratorio Departamental de Salud Pública del Meta cumplir con los lineamientos establecidos en este documento, sin hacer ningún cambio que no esté debidamente documentado y autorizado y se ejecutara según cronograma de análisis de muestras.      PROCEDIMIENTO TÉCNICO PARA EL AISLAMIENTO  Y RECUENTO DE Formas Esporuladas   Clostridium  sulfito reductor    Clostridium sulfito reductor    EN MUESTRAS EN ALIMENTOS DE CONSUMO HUMANO   CODIGO P-SA-81 FECHA DE EMISIÓN 22/07/2016 VERSIÓN 01 PÁGINA Página 3 de 9 5. GENERALIDADES  Algunas de las especies del género Clostridium tienen la propiedad de reducir el ion sulfito a sulfuro que en presencia de citrato férrico o cualquier otra sal (metales pesados) forman colonias de color negro   El recuento de esporas es considerado como el indicador más importante de las bacterias anaerobias capaces de formar esporas. Estas estructuras de supervivencia suelen presentarse en alimentos enlatados que no han sido producidos bajo condiciones de calidad en cada proceso y malas condiciones de almacenamiento  6. REFERENCIAS Manual de técnicas de análisis para control de calidad microbiológico de alimentos para consumo humano. INVIMA 7. DESARROLLO 7.1 Fundamento Los microorgnismos anaerobios obligados (Bacillus, Clostridium...)  sólo pueden crecer a bajos potenciales redox, y algunos únicamente crecerán en ausencia de oxígeno. Suelen encontrarse en la parte interna de los alimentos no procesados y juntamente con los anaerobios facultativos constituyen los principales microorganismos de la alteración. Su valoración en los alimentos nos sirve como indicador de contaminación telúrica remota por la presencia de esporas resistentes. El número máximo de esporas, es decir, el número total de esporos , se puede determinar usando tratamientos térmicos de la muestra del orden de los 70-80°C durante 10-15 minutos, con lo que conseguimos destruir las formas vegetativas y revivificar tan solo los esporos. Al hacer recuento hay que partir del principio de que una espora da lugar a una colonia en el medio de cultivo 7.1.1 AGAR  SPS (AGAR SULFITO- POLIMIXINA - SULFADIAZINA) SPS Agar se utiliza para la detección y recuento de Clostridium perfringens en los alimentos. SPS Agar contiene peptona como fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales. Vitaminas, extracto de levadura material de construcción del complejo B que estimula el crecimiento bacteriano. Citrato férrico de sodio y sulfito son indicadores de H2S. Clostridium reduce el sulfito a sulfuro, que reacciona con el hierro de citrato férrico para formar un negro hierro precipitado de sulfuro. Polisorbato 80 es un agente dispersante. Sulfato de polimixina B y sulfadiazina son inhibidores para los organismos que no sea Clostridium spp. tioglicolato de sodio es un reducción de agente. El agar es el agente solidificante.    PROCEDIMIENTO TÉCNICO PARA EL AISLAMIENTO  Y RECUENTO DE Formas Esporuladas   Clostridium  sulfito reductor    Clostridium sulfito reductor    EN MUESTRAS EN ALIMENTOS DE CONSUMO HUMANO   CODIGO P-SA-81 FECHA DE EMISIÓN 22/07/2016 VERSIÓN 01 PÁGINA Página 4 de 9 7.2 MATERIALES Tener en cuenta los materiales e insumos para la preparación de la muestra se realizara conforme al P-SA — 83 Procedimientos generales de los Análisis Microbiológicos de muestras de alimentos para consumo humano. 7.2.1 Equipos   Incubadora a 35°C ±1°C   Tubos tapa rosca de 150 x 15mm estériles   Jarra de anaerobiosis.   Baño María 80°C 7.2.2 Medios de cultivo y reactivos   Agar SPS (Agar Sulfito- Polimixina - Sulfadiazina)   Kit de generación de condiciones de anaerobiosis Anaerogen TM  (Oxoid). 7.2.3 Cepas de Referencia   Escherichia coli ATCC 25922    Clostridium perfringens  ATCC 13124 7.3 PROCEDIMIENTO 7.3.1 Controles y o curvas de calibración    Control Positivo : A partir de una siembra de Clostridium perfringens  ATCC 13124 sembrado en Agar TSAYE, Agar Pate Count o Agar Nutritivo, se toma una porción de la colonia con la ayuda de un asa recta desechable y estéril, siembra  por  punción en un tubo que contiene Agar SPS (Agar Sulfito- Polimixina - Sulfadiazina) e incubar en cámara de anaerobiosis los tubos a 35°C +/- 1°C - 24, 48 y 72 horas debido a que los microorganismos pueden producir a las 24 horas.      Control Negativo : A partir de una siembra de E.coli  ATCC 25922 sembrado en  Agar TSAYE, Agar Pate Count o Agar Nutritivo, se toma una porción de la colonia con la ayuda de un asa recta desechable y estéril, siembra  por punción en un tubo que contiene Agar SPS (Agar Sulfito- Polimixina - Sulfadiazina) e incubar en cámara de anaerobiosis los tubos a 35°C +/- 1°C - C - 24, 48 y 72 horas debido a que los microorganismos pueden producir a las 24 horas. 7.3.2 Condiciones Ambientales y manejo de equipos  
We Need Your Support
Thank you for visiting our website and your interest in our free products and services. We are nonprofit website to share and download documents. To the running of this website, we need your help to support us.

Thanks to everyone for your continued support.

No, Thanks
SAVE OUR EARTH

We need your sign to support Project to invent "SMART AND CONTROLLABLE REFLECTIVE BALLOONS" to cover the Sun and Save Our Earth.

More details...

Sign Now!

We are very appreciated for your Prompt Action!

x